一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠附睾脂肪干细胞永生化系
细胞别称：mEpi - ADSC；永生化附睾脂肪间充质干细胞
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成年雄性（供体经病原体及代谢疾病筛查）
组织来源：附睾周围脂肪组织微血管基质
生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白包被表面）
细胞形态：长梭形或纺锤状，高核质比，增殖期呈漩涡状排列
细胞代数：稳定传代至P25代以上（经SV40大T抗原转导验证）
细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1.2mL冻存管（无血清冻存体系）
培养基：ADSC专用培养基（含10% FBS + 成脂诱导因子补充剂）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：程序降温冻存液（含7% DMSO及海藻糖），液氮气相长期保存
倍增时间：约24 - 36小时（高增殖活性，连续培养无衰老迹象）
供应限制：仅用于基础研究，禁止体内移植或商业用途
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇动解冻，加入5mL预温培养基离心重悬
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱，4小时后首次换液
传代标准：细胞融合度达70% - 80%（永生化细胞需避免过度接触抑制）
传代比例：1:4至1:6（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶辅助解离）
- 37℃消化3 - 5分钟，离心后重悬轻柔吹打至单细胞悬液
注意事项：
- 传代间隔不超过5天（维持干细胞表型稳定性）
- 定期检测OCT4、CD29等标志物表达
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无动物源冻存液（含7% DMSO + 羟乙基淀粉）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ cells/mL（高密度保障复苏效率）
冻存步骤：
- 消化后离心去除消化酶，预冷冻存液重悬
- 分装至冻存管后直接转入程序降温仪（ - 1℃/min梯度降温至 - 80℃）
复苏验证：
- 复苏后48小时检测增殖速率（应保持倍增时间≤40小时）
- 多向分化验证：成脂诱导14天后油红O染色阳性率≥90%
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 液氮运输罐真空失效导致细胞活性丧失（需提供运输温度记录）
2. 7日内PCR检测证实支原体污染（需提供电泳条带图）
3. 永生化标记基因缺失（需提供SV40大T抗原Western blot结果）
4. 细胞复苏后贴壁率低于85%（提供明场显微照片）
不予重发情形：
1. 未使用指定包被培养皿导致细胞贴壁失败
2. 擅自改用血清替代物影响成脂分化能力
3. 超过建议传代代数（P25）后出现的基因组不稳定性
4. 未执行每三月一次的STR鉴定导致细胞交叉污染
