一、细胞基本属性
- 细胞名称：人胰腺神经内分泌肿瘤细胞永生化（Human Pancreatic Neuroendocrine Tumor Cells, Immortalized）
- 细胞别称：永生化胰腺神经内分泌肿瘤细胞；PNET细胞系；胰腺NET永生化细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 组织来源：胰腺神经内分泌肿瘤组织（经病理学确认）
- 生长特性：贴壁生长（需预包被细胞培养基质）
- 细胞形态：多角形或梭形，单层贴壁，融合后呈致密铺路石样排列
- 细胞代数：P10 - P25（经永生化处理，增殖能力稳定）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：神经内分泌细胞专用培养基（含5% FBS、表皮生长因子及胰岛素样生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 增殖特性：稳定增殖，接触抑制减弱（符合永生化细胞特性）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管需37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀后离心去除冻存液；培养瓶收货后酒精擦拭表面，静置培养箱平衡2小时。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:5（建议接种密度3×10^3 cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含胰酶抑制剂），37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：避免消化时间过长导致细胞膜损伤；传代后需更换新鲜培养基以去除残留酶类。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）。
- 冻存密度：推荐1×10^6 - 2×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤：离心收集细胞后重悬于冻存液，分装至冻存管；梯度降温程序：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能性验证包括神经内分泌标志物染色（如Synaptophysin、Chromogranin A阳性率≥95%）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）；
- 收到后72小时内证实细菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）；
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色图像）；
- STR分型与数据库不匹配。
- 不予重发情形：
- 未按规范进行细胞复苏或冻存操作；
- 使用非推荐培养基或添加剂导致细胞功能异常；
- 实验操作污染（如未在超净台操作）；
- 未在传代后48小时内反馈问题。
