人前庭鞘膜瘤细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06731×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

- 细胞名称:人前庭鞘膜瘤细胞永生化株(hTERT - immortalized)

- 细胞别称:前庭神经鞘瘤细胞;永生化前庭鞘膜瘤细胞

- 种属来源:人(Homo sapiens)

- 疾病背景:源于前庭神经鞘膜瘤组织,经永生化处理(hTERT基因转染)

- 组织来源:前庭神经鞘膜瘤组织(病理学确诊)

- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

- 细胞形态:梭形或纺锤形,核质比高,可形成致密单层

- 细胞代数:P5 - P15(经稳定性验证,保留肿瘤细胞特性)

- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:神经鞘瘤专用培养基(含10% FBS+EGF+bFGF+抗生素)

- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖),-150℃以下长期保存

- 增殖能力:稳定增殖,倍增时间约48 - 60小时(依赖传代密度)

- 应用限制:仅限肿瘤机制研究或药物筛选,不可用于临床或体内移植


二、细胞培养操作指南

- 收货处理

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基

    - 培养瓶:酒精消毒外壁,静置4小时后换液

- 传代标准:融合度达80% - 90%(避免过度接触抑制)

- 传代比例:1:3至1:4(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)

- 消化方法

    - 使用试剂:0.25%胰蛋白酶-EDTA(含0.02%胶原酶)

    - 操作方式:37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落

- 注意事项

    - 消化后需中和液彻底终止反应(含10% FBS)

    - 传代后48小时内避免频繁观察,减少机械扰动


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+胎牛血清替代物)

- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤

    - 离心后重悬于冻存液,分装至冻存管

    - 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期储存

- 复苏验证

    - 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)

    - 功能验证:EdU染色检测增殖活性(P10代内应保持>90%阳性率)


四、售后服务承诺

- 重发标准

    - 细胞运输过程温度异常(需提供物流温度记录)

    - 到货7天内检测出支原体污染(需提供第三方报告)

    - 细胞STR分型与备案不一致

    - 复苏后贴壁率低于70%(需提供显微影像证据)

- 免责情形

    - 未按说明书进行胶原包被导致细胞脱落

    - 使用非指定培养基培养超过2代

    - 液氮储存中断超过72小时

    - 未定期进行核型分析导致遗传漂移


(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,建议定期检测肿瘤标志物表达以确认细胞特性。)