猪子宫内膜上皮细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06721×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

1. 细胞名称:猪子宫内膜上皮细胞永生化(Immortalized Porcine Endometrial Epithelial Cells)

2. 细胞别称:iPEEC;永生化猪子宫内膜上皮细胞

3. 种属来源:家猪(Sus scrofa domesticus)

4. 年龄性别:健康成年母猪(供体经筛选无生殖系统疾病史)

5. 组织来源:子宫角内膜组织

6. 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或细胞外基质包被培养器皿)

7. 细胞形态:单层铺展,融合后呈典型多边形或“铺路石”样排列

8. 细胞代数:P3 - P10(经永生化处理,保持增殖稳定性)

9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

10. 培养基:专用上皮细胞培养基(含5% FBS+表皮生长因子+胰岛素转铁蛋白硒添加剂)

11. 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮气相长期保存

13. 倍增时间:约36 - 48小时(与细胞密度及培养基批次相关)

14. 供应限制:仅限于体外研究使用,禁止用于活体移植或生物制品生产


二、细胞培养操作指南

1. 收货处理

   - 冻存管:37℃水浴解冻后,离心去除冻存液,重悬于预热培养基

   - 培养瓶:酒精擦拭外表面,静置于培养箱1小时恢复微环境

2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐传代间隔48 - 72小时)

3. 传代比例:1:2至1:3(建议初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)

4. 消化方法

   - 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)

   - 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落,加入含血清培养基终止

5. 注意事项

   - 避免消化时间过长(防止细胞膜完整性受损)

   - 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶以促进贴壁


三、细胞冻存操作规范

1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%基础培养基+抗冻蛋白)

2. 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL

3. 冻存步骤

   - 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液

   - 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮储存

4. 复苏验证

   - 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)

   - 功能验证:细胞角蛋白18免疫荧光染色阳性率>95%


四、售后服务承诺

1. 重发标准

   - 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供温度追踪报告)

   - 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测证明)

   - 细胞复苏存活率低于85%(按我方提供方法检测)

   - 永生化标记基因PCR验证不通过

2. 不予重发情形

   - 未按说明书进行预包被处理导致贴壁失败

   - 自行更换培养基或添加剂引发细胞异常

   - 超低温保存设备故障导致的反复冻融

   - 未使用指定传代试剂造成细胞功能损伤

(注:所有操作需符合生物安全规范,实验废弃物需灭菌处理)