小鼠肾小球系膜细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06701×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

细胞名称:小鼠肾小球系膜细胞永生化(Immortalized Mouse Glomerular Mesangial Cells)

细胞别称:iMMC;永生化肾小球系膜细胞;小鼠系膜细胞

种属来源:小鼠(Mus musculus)

年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经病理筛选无肾脏疾病史)

组织来源:肾小球系膜组织

生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态:长梭形或多角形,融合后呈网状排列

细胞代数:P5 - P15(经永生化处理,增殖能力稳定)

细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 1%青链霉素+10mM HEPES缓冲液)

培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

倍增时间:~24 - 48小时(依赖血清浓度与传代密度)

供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体实验


二、细胞培养操作指南

收货处理:

- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基

- 培养瓶:酒精消毒表面,静置于培养箱4小时恢复代谢

传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)

传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)

消化方法:

- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)

- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至完全分离

注意事项:

- 避免频繁观察影响贴壁(建议传代后静置12小时)

- 传代后48小时内避免更换培养基


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)

细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL

冻存步骤:

- 消化离心后缓慢加入预冷冻存液

- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存

复苏验证:

- 复苏后48小时检测细胞活力(台盼蓝拒染率≥90%)

- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P8代细胞应保持收缩蛋白表达)


四、售后服务承诺

重发标准:

1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)

2. 到货7天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)

3. 细胞STR谱系与数据库不匹配

4. 复苏后增殖能力缺失(需提供连续3天增殖曲线)

不予重发情形:

1. 未按说明书进行胶原包被导致贴壁失败

2. 自行修改培养基成分引发功能异常

3. 超代次使用(超过P15代)导致遗传漂变

4. 未使用指定消化酶造成细胞损伤


本产品经SV40大T抗原永生化处理,保留系膜细胞收缩功能及细胞外基质分泌特性,适用于肾小球疾病机制及药物筛选研究