一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肾小球系膜细胞永生化(Immortalized Mouse Glomerular Mesangial Cells)
细胞别称:iMMC;永生化肾小球系膜细胞;小鼠系膜细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经病理筛选无肾脏疾病史)
组织来源:肾小球系膜组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或多角形,融合后呈网状排列
细胞代数:P5 - P15(经永生化处理,增殖能力稳定)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS + 1%青链霉素+10mM HEPES缓冲液)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖血清浓度与传代密度)
供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,静置于培养箱4小时恢复代谢
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至完全分离
注意事项:
- 避免频繁观察影响贴壁(建议传代后静置12小时)
- 传代后48小时内避免更换培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化离心后缓慢加入预冷冻存液
- 梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞活力(台盼蓝拒染率≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P8代细胞应保持收缩蛋白表达)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
2. 到货7天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞STR谱系与数据库不匹配
4. 复苏后增殖能力缺失(需提供连续3天增殖曲线)
不予重发情形:
1. 未按说明书进行胶原包被导致贴壁失败
2. 自行修改培养基成分引发功能异常
3. 超代次使用(超过P15代)导致遗传漂变
4. 未使用指定消化酶造成细胞损伤
本产品经SV40大T抗原永生化处理,保留系膜细胞收缩功能及细胞外基质分泌特性,适用于肾小球疾病机制及药物筛选研究