一、细胞基本属性
- 细胞名称：小鼠胰腺星状细胞永生化
- 细胞别称：iMPSC（Immortalized Mouse Pancreatic Stellate Cells）；永生化胰腺星状细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康成年小鼠（性别不限，供体无胰腺疾病史）
- 组织来源：胰腺组织星状细胞分离
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：活化前呈长梭形，活化后伸展为典型星状多突起
- 细胞代数：P5 - P15（永生化特性确保遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS + 1%青霉素 - 链霉素+星状细胞活化抑制因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），- 150℃以下长期保存
- 增殖特性：静息状态增殖缓慢（~72小时倍增），活化后增殖加速至48小时
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀离心
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时适应环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每5 - 7天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.1%胶原酶），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项：
- 避免机械刮取（防止意外激活星状细胞）
- 传代后12小时补充新鲜培养基以维持静息状态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：消化离心后重悬于预冷冻存液，程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证：复苏后48小时检测细胞存活率（台盼蓝拒染率≥90%），功能验证：α - SMA免疫荧光检测（P8代细胞应维持静息态低表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
- 到货7日内经PCR证实支原体污染
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色影像）
- 永生化标记基因PCR验证不符
- 不予重发情形：
- 使用含高浓度血清（＞15%）培养基导致异常活化
- 未按规范进行胶原酶辅助消化引发机械损伤
- 擅自使用TGF - β等激活因子干预后功能异常
- 超过说明书建议代次（P15）仍继续传代
