一、细胞基本属性
- 细胞名称：人子宫内膜上皮细胞永生化（Immortalized Human Endometrial Epithelial Cells）
- 细胞别称：iHEEC；永生化子宫内膜上皮细胞
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：健康成年女性（供体筛选无妇科疾病史）
- 组织来源：子宫内膜组织（基底层与功能层混合提取）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈规则多边形
- 细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，增殖稳定性显著提升）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（无血清冻存体系）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS+1%上皮细胞特异性生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞膜稳定剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（永生化后增殖速率显著提高）
- 供应限制：仅限科学研究，禁止临床治疗或生物医药产品开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.1%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至完全脱离基质。
- 注意事项：
- 严格监控消化终点（防止紧密连接蛋白降解）。
- 首次换液需在传代后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔混悬于冻存液。
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期存储。
- 复苏验证：
- 复苏后12小时存活率≥90%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：细胞角蛋白18/19免疫荧光染色（P8代内表达率≥98%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）。
- 到货48小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞复苏存活率低于85%（按规范操作复测确认）。
- 永生化标志基因（如SV40 LT）PCR检测阴性。
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养皿导致贴壁失败。
- 自行更改培养基成分引发细胞分化。
- 液氮保存设备故障导致反复冻融。
- 未执行推荐传代频率致使细胞老化。
