一、细胞基本属性
- 细胞名称：人原代神经鞘膜瘤细胞永生化
- 细胞别称：永生化神经鞘膜瘤细胞；iSchwannoma Cells
- 种属来源：人（Homo sapiens）
- 年龄性别：原代细胞供体信息保密（经伦理审查批准，病理确诊为神经鞘膜瘤）
- 组织来源：手术切除的神经鞘膜瘤组织（经病理学验证）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：梭形至多极形态，融合后呈交错网状排列
- 细胞代数：P15 - P25（经SV40大T抗原永生化处理，保持稳定增殖能力）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管（含血清替代型冻存液）
- 培养基：神经鞘瘤专用培养基（含10% FBS+EGF+bFGF+胰岛素转铁蛋白硒复合物）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO+海藻糖），液氮气相长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖生长因子浓度）
- 供应限制：仅用于肿瘤机制研究，不可用于体内移植或药物筛选
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后加入5mL预冷培养基离心去冻存液
- 培养瓶：紫外线照射外包装后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准：细胞密度达80% - 85%（避免过度融合诱发自发分化）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶-胶原酶混合消化液（含1mM EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 消化终止需使用含10% FBS的完全培养基
- 传代后48小时内避免换液以维持细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无蛋白冻存液（含7.5% DMSO+羟乙基淀粉）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后细胞经100×g离心5分钟重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 1h → -80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时进行Calcein - AM/PI双染检测存活率（≥85%）
- 功能验证：S100β免疫荧光染色（P20代细胞应维持神经鞘细胞标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 液氮运输罐真空失效导致细胞升温（需提供温度记录曲线）
- 7天内经qPCR证实支原体污染
- 复苏存活率低于80%（需提供双染检测原始图像）
- STR分型与入库数据不一致
- 不予重发情形：
- 使用非胶原包被培养皿导致贴壁失败
- 擅自添加神经营养因子改变细胞表型
- 超过推荐代数（P25）继续扩增引发基因组不稳定
- 未进行定期S100β标记检测导致细胞身份混淆
