人肠息肉上皮细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06571×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

- 细胞名称:人肠息肉上皮细胞(永生化)(Human Polyp - derived Immortalized Intestinal Epithelial Cells)

- 细胞别称:HPP - IEC;永生化肠息肉上皮细胞;肠息肉上皮细胞系

- 种属来源:人(Homo sapiens)

- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无遗传性肠道疾病史)

- 组织来源:肠息肉组织(经病理学确认的良性息肉)

- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)

- 细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈多边形紧密连接

- 细胞代数:P10 - P20(经永生化处理,稳定传代且保留上皮特性)

- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:专用肠上皮细胞培养基(含5% FBS + EGF/TGF - β抑制剂复合添加剂)

- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖生长因子浓度与培养密度)

- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或药物开发


二、细胞培养操作指南

- 收货处理

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基

    - 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱1小时恢复代谢

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)

- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)

- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含钙离子螯合剂),37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱落

- 注意事项

    - 避免多次离心(防止微绒毛结构损伤)

    - 传代后12小时补充新鲜培养基以维持极性


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂)

- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL

- 冻存步骤:离心后重悬于冻存液,分装至冻存管;程序降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存

- 复苏验证

    - 复苏后48小时检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%)

    - 功能验证:ZO - 1免疫荧光染色确认紧密连接完整性


四、售后服务承诺

- 重发标准

    - 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)

    - 5日内证实支原体污染(需提供qPCR检测结果)

    - 细胞增殖停滞(传代3次内未达对数生长期)

    - 永生化标记基因检测与说明书不符

- 不予重发情形

    - 使用非配套培养基或未包被培养器皿

    - 解冻后超48小时未进行传代操作

    - 实验污染未及时反馈(收货超7天)

    - 自行改造细胞基因组导致功能异常