人副神经节瘤细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06561×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

细胞名称:人副神经节瘤细胞永生化

细胞别称:永生化副神经节瘤细胞;iPGL细胞

种属来源:人(Homo sapiens)

组织来源:副神经节瘤组织

生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及特定生长因子)

细胞形态:多角形或梭形,呈现肿瘤细胞典型堆积生长特性

永生化方法:SV40大T抗原转染

细胞代数:P15 - P30(稳定表达永生化标记基因)

细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗+永生化维持因子)

培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存

增殖能力:倍增时间约36 - 48小时(连续传代稳定性≥95%)

应用限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于临床治疗或体内移植


二、细胞培养操作指南

收货处理:

• 冻存管复苏:37℃水浴快速解冻后离心去冻存液,使用预温培养基重悬

• 培养瓶处理:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时

传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)

传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)

消化方法:

• 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)

• 37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化液

关键提示:

• 维持SV40抗原表达需定期添加筛选抗生素

• 传代后12小时补充5ng/mL碱性成纤维细胞生长因子


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂)

冻存密度:5×10⁶ cells/mL(保证复苏后高活性)

冻存程序:

• 对数生长期细胞经梯度离心后重悬

• 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储

质控标准:

• 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)

• 永生化标记基因表达验证(每批次提供RT - PCR检测报告)


四、售后服务承诺

质量保障:

• 附STR鉴定报告及永生化基因表达验证数据

• 提供细胞培养操作视频教程及专家指导

重发条款:

• 液氮运输中温度异常导致细胞失活(需提供温度记录)

• 到货48小时内证实支原体污染(需提供检测原始数据)

免责声明:

• 未按手册要求进行抗生素筛选导致基因沉默

• 自行采用悬浮培养等非常规操作引发表型改变

• 超过推荐代数(P30)后出现的基因组不稳定性


(注:本产品通过伦理审查,符合《人源性生物样本研究规范》,所有操作需在生物安全二级实验室进行)