一、细胞基本属性
细胞名称:人副神经节瘤细胞永生化
细胞别称:永生化副神经节瘤细胞;iPGL细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
组织来源:副神经节瘤组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及特定生长因子)
细胞形态:多角形或梭形,呈现肿瘤细胞典型堆积生长特性
永生化方法:SV40大T抗原转染
细胞代数:P15 - P30(稳定表达永生化标记基因)
细胞规格:1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗+永生化维持因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
增殖能力:倍增时间约36 - 48小时(连续传代稳定性≥95%)
应用限制:仅限肿瘤机制研究,不可用于临床治疗或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
• 冻存管复苏:37℃水浴快速解冻后离心去冻存液,使用预温培养基重悬
• 培养瓶处理:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
• 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)
• 37℃消化3 - 5分钟,离心后完全去除消化液
关键提示:
• 维持SV40抗原表达需定期添加筛选抗生素
• 传代后12小时补充5ng/mL碱性成纤维细胞生长因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖保护剂)
冻存密度:5×10⁶ cells/mL(保证复苏后高活性)
冻存程序:
• 对数生长期细胞经梯度离心后重悬
• 程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
质控标准:
• 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)
• 永生化标记基因表达验证(每批次提供RT - PCR检测报告)
四、售后服务承诺
质量保障:
• 附STR鉴定报告及永生化基因表达验证数据
• 提供细胞培养操作视频教程及专家指导
重发条款:
• 液氮运输中温度异常导致细胞失活(需提供温度记录)
• 到货48小时内证实支原体污染(需提供检测原始数据)
免责声明:
• 未按手册要求进行抗生素筛选导致基因沉默
• 自行采用悬浮培养等非常规操作引发表型改变
• 超过推荐代数(P30)后出现的基因组不稳定性
(注:本产品通过伦理审查,符合《人源性生物样本研究规范》,所有操作需在生物安全二级实验室进行)