一、细胞基本属性
细胞名称：猪骨骼肌卫星细胞永生化
细胞别称：永生化猪骨骼肌卫星细胞；猪肌卫星细胞；iPSMuSC
种属来源：猪（Sus scrofa domesticus）
年龄性别：健康幼猪或成猪（性别不限，供体筛选无肌肉疾病史）
组织来源：骨骼肌组织（经酶消化法分离纯化）
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：单层梭形或星形，增殖活跃时呈簇状分布，接触抑制后呈扁平多角形
细胞代数：P5 - P15（经SV40 T抗原永生化处理，保持稳定增殖能力）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：骨骼肌细胞专用培养基（含5% FBS+10 ng/mL bFGF+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO+海藻糖保护剂），-150℃液氮长期保存
倍增时间：24 - 48小时（依赖生长因子浓度及传代密度）
供应限制：仅限体外研究，不可用于活体移植或转基因动物制备
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱1小时恢复
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项：
- 传代后12小时内避免移动培养瓶以促进贴壁
- 每48小时更换培养基（饥饿处理可诱导成肌分化潜能）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+5%海藻糖）
细胞密度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL（对数生长期细胞为佳）
冻存步骤：
- 离心后弃上清，缓慢滴加预冷冻存液重悬
- 程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证：
- 复苏后12小时检测存活率（台盼蓝染色法≥90%）
- 功能验证：成肌诱导7天后检测MyoD1表达及肌管形成率
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输超时或温度记录异常（需提供物流温度监控数据）
2. 到货72小时内PCR检测证实支原体污染
3. 细胞复苏后活性低于85%（需提供台盼蓝染色视频记录）
4. 核型分析显示非猪源性污染
不予重发情形：
1. 使用含抗生素培养基掩盖污染问题
2. 未按推荐传代密度导致细胞过早衰老
3. 私自进行基因编辑操作引发基因组异常
4. 未保留原始传代记录及冻存备份
（注：本产品经STR鉴定及端粒酶活性验证，提供电子版质检报告）
