一、细胞基本属性
- 细胞名称:山羊乳腺上皮细胞永生化(Immortalized Goat Mammary Epithelial Cells)
- 细胞别称:GMEC;山羊乳腺细胞;乳腺上皮细胞系
- 种属来源:山羊(Capra hircus)
- 年龄性别:健康成年山羊(性别不限,供体筛选无乳腺疾病史)
- 组织来源:乳腺组织(经病理学确认正常)
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型“铺路石样”单层,增殖稳定后呈多边形
- 细胞代数:P3 - P8(经永生化处理,确保增殖能力与功能稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Epithelial Cell Medium(含5% FBS+表皮生长因子+胰岛素添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或转基因动物研究
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡1小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止(加入含血清培养基中和)。
- 注意事项:避免消化过度(影响细胞极性蛋白表达);传代后12小时更换培养基以清除残留酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻缓重悬于冻存液;梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
- 复苏验证:复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%);功能验证:β - 酪蛋白分泌检测(P5代细胞应维持基础泌乳功能)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);
- 7日内证实微生物污染(需提交第三方检测报告);
- 复苏后存活率低于85%(需提供染色照片);
- 永生化标志基因鉴定与描述不符。
- 不予重发情形:
- 客户未按规范进行预包被处理导致贴壁失败;
- 使用非指定培养基或添加剂引发功能异常;
- 未按时传代导致细胞老化;
- 自行改造细胞后出现遗传漂变。