人主动脉内皮细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06521×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

- 细胞名称:人主动脉内皮细胞(永生化)

- 细胞别称:HAEC - Immortalized;主动脉内皮细胞;大动脉内皮细胞

- 种属来源:人(Homo sapiens)

- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)

- 组织来源:主动脉血管段

- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质成分)

- 细胞形态:典型单层铺路石样,接触抑制后呈规则多角形

- 细胞代数:P3 - P10(经永生化处理,遗传稳定性验证)

- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:Endothelial Cell Medium(含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂)

- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存

- 倍增时间:~48 - 72小时(稳定增殖,依赖传代密度)

- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基混匀离心后接种

    - 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱2小时平衡后更换新鲜培养基

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每3 - 4天传代)

- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)

- 消化方法:

    - 使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)

    - 37℃消化1 - 2分钟,镜下观察细胞边缘收缩后终止

- 注意事项:

    - 避免消化液残留(建议使用含血清培养基终止)

    - 传代后24小时内避免频繁移动培养瓶


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)

- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤:

    - 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液

    - 梯度降温:4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存

- 复苏验证:

    - 复苏后24小时存活率≥95%(台盼蓝染色法)

    - 功能验证:CD31免疫荧光染色确认内皮特性


四、售后服务承诺

- 重发标准:

    - 运输过程温度失控(需提供干冰融化证据)

    - 3日内证实支原体污染(需提供检测报告)

    - 复苏后存活率低于90%(按规范操作验证)

    - STR基因谱与数据库不符

- 不予重发情形:

    - 收货后超72小时未复苏

    - 使用非指定培养基或添加剂

    - 未按规范进行传代导致细胞老化

    - 实验污染未及时反馈(超7天未联系)