人颈静脉球瘤细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06511×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

- 细胞名称:永生化人颈静脉球瘤细胞(Immortalized Human Jugular Paraganglioma Cells)

- 细胞别称:iJPG细胞;颈静脉球瘤细胞;副神经节瘤细胞

- 种属来源:人(Homo sapiens)

- 组织来源:颈静脉球瘤组织(经病理确诊)

- 永生化方法:SV40大T抗原转染(经PCR验证)

- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)

- 细胞形态:不规则多边形或梭形,核质比高,可见瘤细胞典型簇状排列

- 细胞代数:P5 - P20(经端粒酶活性检测确认增殖稳定性)

- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1% GlutaMAX+1%丙酮酸钠+0.1% HEPES)

- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存

- 增殖特性:倍增时间约36 - 48小时(与肿瘤亚型相关)

- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内成瘤实验


二、细胞培养操作指南

- 收货处理

    - 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预温培养基轻柔混匀

    - 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时适应

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)

- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)

- 消化方法

    - 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)

    - 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止

- 注意事项

    - 避免机械吹打过度(易损伤细胞表面神经内分泌标志物)

    - 首次传代后需48小时稳定期再开展实验


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS+渗透保护剂)

- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤

    - 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液

    - 程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 液氮长期保存

- 复苏验证

    - 复苏后48小时存活率≥85%(台盼蓝染色法)

    - 功能验证:神经内分泌标志物染色(Synaptophysin、Chromogranin A阳性率≥90%)


四、售后服务承诺

- 重发标准

    - 运输过程温度记录异常且细胞复苏活力<80%

    - 7天内经qPCR证实支原体污染

    - STR分型与存档数据不符(需提供第三方检测报告)

- 不予重发情形

    - 使用非配套培养基或未添加指定生长因子

    - 细胞培养超过推荐代数(P20)后出现性状改变

    - 未按规范进行神经内分泌功能验证即开展下游实验

    - 液氮储存设备故障导致的反复冻融


(注:本产品经伦理审查合规获取,所有操作需符合《人源性生物样本研究伦理规范》。)