一、细胞基本属性
- 细胞名称:永生化兔肝间质细胞(Immortalized Rabbit Liver Interstitial Cells)
- 细胞别称:RLiSC;兔肝间质细胞;肝星状细胞系
- 种属来源:兔(Oryctolagus cuniculus)
- 年龄性别:健康成年兔(性别不限,供体筛选无肝脏疾病史)
- 组织来源:肝脏间质组织(经胶原酶灌注分离纯化)
- 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被培养器皿)
- 细胞形态:典型长梭形或多角形,可呈现星状伪足结构
- 细胞代数:P10 - P20(经永生化处理,增殖能力稳定)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+肝细胞生长因子+抗生素添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含8% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 36小时(永生化细胞增殖速率稳定)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱1小时平衡温湿度。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(永生化细胞建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含钙镁离子平衡液)。
- 37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项:
- 避免细胞过度融合(可能激活自发分化特性)。
- 传代后12小时内避免频繁观察,减少扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO+海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液。
- 程序降温:4℃30min → -20℃1h → -80℃12h → 液氮长期储存。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(≥90%为合格)。
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P15代细胞应维持间质表型)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 干冰运输失效导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 5天内证实真菌/支原体污染(需提供第三方检测报告)。
- 复苏后贴壁率低于80%(需提供明场显微图像)。
- 永生化标志基因PCR检测不达标。
- 不予重发情形:
- 客户未使用指定培养基导致细胞分化。
- 培养环境CO₂浓度异常引发细胞状态问题。
- 擅自进行基因编辑操作后出现异常。
- 未按规范进行定期传代导致细胞老化。
(注:本产品经SV40大T抗原转导永生化处理,保留原代细胞功能特性,适用于肝纤维化机制研究、药物毒性测试等体外实验。)