一、细胞基本属性
细胞名称:人胰腺癌细胞永生化
细胞别称:永生化胰腺癌细胞;胰腺癌永生化细胞系
种属来源:人(Homo sapiens)
疾病背景:源自胰腺导管腺癌组织,经永生化处理
组织来源:胰腺癌组织原代分离后永生化
生长特性:贴壁生长(依赖特定细胞外基质)
细胞形态:不规则多角形,增殖活跃时呈铺路石样排列
细胞代数:P10 - P20(保证永生化特性及遗传稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:胰腺癌专用培养基(含10% FBS+表皮生长因子+胰岛素转铁蛋白添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
增殖特性:倍增时间约24 - 48小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
供应限制:仅供肿瘤机制研究及药物筛选,禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后接种于预铺胶原的培养皿
- 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱,4小时后首次换液
传代标准:融合度达90% - 95%(推荐每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项:
- 永生化细胞需定期检测端粒酶活性(建议每10代检测一次)
- 传代后6小时内避免移动培养器皿以防贴壁延迟
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
冻存密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存程序:
- 程序降温仪控制(每分钟降1℃至 - 80℃)
- 24小时后转移至液氮气相长期保存
复苏验证:
- 台盼蓝存活率≥90%(需在解冻后2小时内完成检测)
- 功能验证:软琼脂克隆形成实验(P15代细胞应保持成瘤特性)
四、售后服务承诺
重发保障:
1. 干冰运输期间温度记录异常(需提供物流温度曲线)
2. 到货72小时内证实支原体污染(需第三方检测报告)
3. 细胞STR分型与数据库不匹配
4. 永生化标志物(如hTERT)表达缺失
免责条款:
1. 未使用指定胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 擅自进行基因编辑后引发的功能异常
3. 未定期检测致瘤性导致的实验偏差
4. 超出推荐代数范围(P20以上)继续传代
(注:本产品已通过ISO细胞系认证,附STR图谱及端粒酶活性检测报告)