一、细胞基本属性
- 细胞名称:小鼠诱导型多能干细胞OSK - 1
- 细胞别称:iPSC OSK - 1;多能干细胞OSK株系
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 重编程因子:Oct4、Sox2、Klf4(OSK组合)
- 组织来源:成体体细胞经非整合型载体诱导重编程
- 生长特性:贴壁生长(依赖饲养层或基质胶支持)
- 细胞形态:典型胚胎干细胞样克隆,边缘清晰,核质比高
- 细胞代数:P5 - P15(维持多能性及基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:多能干细胞维持培养基(含LIF及双抑制剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:程序降温后液氮保存(-196℃)
- 多能性标志:Nanog、SSEA - 1阳性(免疫荧光验证)
- 供应限制:仅限基础研究,不可用于生殖或临床研究
二、细胞培养操作指南
- 复苏处理:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后接种于预铺基质胶的培养皿。
- 传代标准:克隆密度达70% - 80%或边缘接触融合时传代。
- 传代比例:1:4至1:6(机械法或酶消化法分散克隆)
- 消化方法:使用0.5 mM EDTA/PBS轻柔解离,37℃处理3 - 5分钟。
- 关键注意:
- 避免单细胞悬液过度离心(建议200g离心3分钟)。
- 传代后12小时补充新鲜培养基以维持多能性。
- 定期检测支原体污染(每2代建议检测一次)。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% KSR)。
- 冻存密度:1×10^6 - 2×10^6 cells/mL。
- 冻存程序:
- 4℃平衡10分钟。
- -80℃过夜(使用程序降温盒)。
- 次日转移至液氮气相长期保存。
- 质检标准:
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 多能性验证:体外拟胚体形成能力检测。
- 核型分析:第15代内维持正常染色体核型。
四、售后服务承诺
- 重发条款:
- 干冰运输过程温度记录异常(需提供温度记录仪数据)。
- 到货48小时内证实支原体污染(需第三方检测报告)。
- 细胞多能性标志物表达缺失(需提供免疫荧光原始数据)。
- STR鉴定与备案信息不符。
- 免责条款:
- 客户未使用指定基质胶导致贴壁失败。
- 自主更换培养基成分引发的分化现象。
- 未按时传代导致的克隆过度分化。
- 液氮保存中断超过72小时。