一、细胞基本属性
- 细胞名称:SVEC4-10小鼠淋巴结血管上皮样细胞
- 细胞别称:SVEC细胞;小鼠淋巴管内皮细胞;淋巴结血管内皮细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景特性:永生化细胞系(源于C3H/HeJ小鼠淋巴结血管内皮细胞)
- 组织来源:淋巴结血管段(经SV40病毒转染建系)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:多角形或纺锤形,单层铺展后呈“铺路石样”排列
- 细胞代数:P5 - P10(建议使用前验证特定代次功能标记物)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%内皮细胞生长补充剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖传代密度及培养基批次)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱4小时待细胞贴壁。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)。
- 37℃消化30秒 - 1分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项:
- 传代后需更换胶原包被的培养器皿。
- 避免频繁观察扰动细胞贴壁(建议传代后静置24小时)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮储存。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)。
- 功能验证:CD31/VEGFR - 2免疫荧光染色(P8代内应表达阳性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度曲线)。
2. 到货5天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)。
3. 细胞复苏后贴壁率低于80%(需提供显微图像)。
4. 细胞种属鉴定与描述不符(需提供STR比对结果)。
- 不予重发情形:
1. 未使用胶原包被培养器皿导致细胞脱落。
2. 自行更改培养基成分引发功能异常。
3. 液氮储存中断导致细胞失活。
4. 未按操作手册进行代次控制引发遗传漂变。