一、细胞基本属性
- 细胞名称：TM4正常小鼠睾丸Sertoli细胞
- 细胞别称：TM4细胞；小鼠睾丸支持细胞；生精小管滋养细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康新生或幼年雄性小鼠（供体筛选无生殖系统异常史）
- 组织来源：睾丸组织生精小管基底膜区
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则多边形或梭形，贴壁后呈单层铺路石样排列
- 细胞代数：P3 - P8（维持Sertoli细胞特异性功能的最佳代数区间）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含10% FBS + 1%双抗+10 ng/mL转铁蛋白）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含5% DMSO及细胞保护剂）， -150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 60小时（受血清浓度及细胞密度影响）
- 供应限制：仅限基础研究使用，不可用于临床应用或转基因操作
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置培养箱2小时后观察贴壁情况
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（高密度可能诱导自噬反应）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶辅助消化），37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：消化后需用含血清培养基完全中和酶活性，首次传代建议保留原代细胞条件培养基（维持细胞间通讯）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含5% DMSO + 30% FBS +抗冻蛋白）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后执行梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
- 复苏验证：复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%），功能验证：免疫荧光染色WT1蛋白表达（维持血睾屏障特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1.运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）
- 2.到货72小时内检测出支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 3.细胞贴壁率低于80%（需提供接种后24小时显微照片）
- 4.物种鉴定结果与标识不符（STR比对误差≥3个位点）
- 不予重发情形
- 1.未使用胶原包被培养皿导致细胞贴壁失败
- 2.自行修改培养基配方引发细胞形态异常
- 3.超低温保存设备故障导致反复冻融
- 4.未按操作手册进行消化传代（酶用量或时间超限）
