一、细胞基本属性
- 细胞名称:U14小鼠子宫颈癌细胞(Mouse Uterine Cervical Carcinoma Cells U14)
- 细胞别称:U14细胞;小鼠宫颈癌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景特征:源于BALB/c小鼠子宫颈癌组织,具有稳定致瘤性
- 组织来源:子宫颈癌原位组织(经小鼠体内传代筛选)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形或纺锤形,核质比高,可见伪足延伸
- 细胞代数:P5 - P15(建议传代不超过15代以维持致瘤特性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含含血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:饱和湿度
- 冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
- 增殖能力:倍增时间约18 - 24小时(与接种密度相关)
- 应用限制:仅限肿瘤机制研究或药物筛选实验,不可用于人体相关研究
二、细胞培养操作指南
- 复苏处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 首次接种密度建议≥2×10^4 cells/cm²
- 传代标准:融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(低密度接种易诱发细胞分化)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至完全脱落
- 关键注意:
- 传代后6小时内避免频繁移动培养瓶
- 培养基需每48小时更换以维持高代谢需求
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 冻存密度:推荐浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存流程:
- 细胞消化后离心去上清,冰上预冷冻存液重悬
- 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮储存
- 质检要求:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 致瘤性验证:BALB/c小鼠皮下接种后14天内成瘤
四、质量保障条款(售后服务承诺)
- 重发条件:
- 干冰运输全程温度> - 130℃(需物流温度记录证明)
- 到货72小时内检测出支原体污染(需第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率<80%(按规范操作前提下)
- 免责声明:
- 使用非指定培养基或擅自添加生长因子
- 未按规范进行胶原包被导致贴壁失败
- 传代次数超过P15引发的遗传漂移
- 液氮保存中断超过24小时导致的细胞失活
(注:本产品需符合《实验动物伦理审查指南》,所有动物源细胞仅用于体外研究)