一、细胞基本属性
- 细胞名称：SV40 - MES - 13小鼠肾小球系膜细胞
- 细胞别称：MES - 13细胞；肾小球系膜细胞系；SV40永生化系膜细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 品系背景：SV40大T抗原转染永生化，来源于C57BL/6品系
- 组织来源：肾小球系膜组织经SV40病毒转染获得永生化特性
- 生长特性：贴壁生长（无需特殊基质包被，适应常规培养条件）
- 细胞形态：长梭形或星形不规则状，接触抑制特征弱
- 细胞代数：P10 - P20（建议传代不超过25代以维持功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640基础培养基（含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+胰岛素 - 转铁蛋白添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（与血清批次及培养密度相关）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于体内实验或临床用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡
- 传代标准：细胞融合度达70% - 80%（高密度易诱发过度增殖）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐起始密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化30 - 60秒，显微镜下见细胞间隙扩大后终止
- 注意事项：避免胰酶作用超时（易导致细胞膜完整性受损）；传代后6小时内不建议更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 冻存密度：1×10^6 - 5×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：预冷冻存管至4℃，细胞悬液分装后程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮储存
- 复苏验证：存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能验证：α - 平滑肌肌动蛋白（α - SMA）免疫荧光检测（P15代细胞应保持标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1. 物流温控失效导致细胞死亡（需提供运输温度记录）；2. 到货48小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）；3. 细胞复苏存活率低于85%；4. STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：1. 使用非指定培养基或添加生长因子未备案；2. 未按规范进行传代导致细胞衰老；3. 液氮保存设备故障导致的冻存管破裂；4. 实验操作污染后未及时反馈
