一、细胞基本属性
细胞名称:Sp2/0小鼠骨髓瘤细胞
细胞别称:Sp2/0 - Ag14;小鼠骨髓瘤细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
组织来源:BALB/c小鼠骨髓瘤组织
生长特性:悬浮生长(可形成松散细胞团)
细胞形态:圆形或类圆形,单细胞或聚集体形式存在
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数以保证融合效率)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与营养条件)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:直接转移至培养箱静置4小时,待细胞团自然分散
传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL以上(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:5至1:10(推荐接种密度2×10^5 cells/mL)
操作方法:
轻柔吹打细胞悬液,避免机械损伤
离心收集后更换新鲜培养基重悬分瓶
注意事项:
避免过度离心(建议200×g,3分钟)
定期检测支原体,防止交叉污染
培养液中需补充β - 巯基乙醇(终浓度50μM)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
离心收集对数生长期细胞
重悬于预冷冻存液后分装至冻存管
程序降温:4℃ 30min→ - 80℃ 24h→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
功能验证:与脾细胞融合效率检测(P8代细胞应维持>50%融合率)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供液氮罐温度记录)
2. 到货7天内证实支原体/细菌污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞复苏后存活率低于85%
4. 种属鉴定结果与宣传不符
不予重发情形:
1. 未按推荐方法进行细胞融合实验
2. 使用非指定培养基导致细胞增殖异常
3. 未定期进行支原体筛查引发污染扩散
4. 细胞培养超过推荐代数导致功能退化