一、细胞基本属性
- 细胞名称:SDOW - 17小鼠杂交瘤细胞
- 细胞别称:SDOW - 17杂交瘤;小鼠骨髓瘤杂交细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景品系:BALB/c小鼠(脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合)
- 组织来源:免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合产物
- 生长特性:悬浮聚团生长(部分贴壁依赖性亚系需动态观察)
- 细胞形态:圆形或椭圆形,聚集成葡萄串状团簇
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证抗体分泌稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含含血清冻存液)或T25培养瓶(悬浮培养)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%丙酮酸钠+2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:含血清冻存液(10% DMSO+90% FBS),液氮长期保存
- 抗体分泌:稳定分泌小鼠源性单克隆抗体(IgG类,靶标特性需用户验证)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于体内实验或商业化生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:直接置于CO₂培养箱,静置4小时后轻柔吹散细胞团
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养基明显酸化(pH<6.8)
- 传代比例:1:3至1:5(维持密度2×10^5-5×10^5 cells/mL)
- 操作方法
- 离心收集细胞(200g×5min),旧培养基保留部分用于重悬
- 轻柔吹打分散团块,按比例接种至新培养基
- 注意事项
- 避免高速离心(>300g)导致细胞膜损伤
- 定期检测抗体效价(建议每3代通过ELISA验证分泌稳定性)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:90%高浓度FBS+10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10^6-1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集高活力细胞(台盼蓝拒染率>95%)
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮气相长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞活率(≥90%为合格)
- 功能验证:间接ELISA检测上清抗体效价(较冻存前下降≤1个滴度)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 到货7天内证实交叉污染(需提供STR鉴定报告)
- 抗体分泌功能丧失(需提供连续3代ELISA检测数据)
- 不予重发情形
- 使用含β - 巯基乙醇的培养基导致细胞凋亡
- 未定期亚克隆筛选导致抗体分泌丢失
- 长时间过度稀释培养(密度<1×10^5 cells/mL)
- 未按规范进行支原体清除预处理