一、细胞基本属性
- 细胞名称：RM-1+LUC小鼠前列腺癌细胞荧光素酶标记
- 细胞别称：RM-1 Luc细胞；荧光素酶标记小鼠前列腺癌细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景品系：C57BL/6小鼠来源（雄性）
- 组织来源：前列腺组织（经肿瘤诱导模型建立）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：上皮样，贴壁后呈不规则多边形，增殖期可见伪足伸展
- 细胞代数：P3 - P10（经荧光素酶活性及STR稳定性验证）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+2μg/mL Puromycin筛选标记）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 荧光素酶活性：稳定表达Firefly Luciferase（需Luciferin底物检测，发光强度≥1×10^4 RLU/μg蛋白）
- 应用方向：适用于前列腺癌转移机制研究、活体生物发光成像（IVIS系统）及药物敏感性测试
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或人体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于5mL预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱4小时待细胞贴壁
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时操作）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化30 - 60秒，轻拍瓶壁促使细胞脱落，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项：
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶（影响荧光素酶表达稳定性）
- 定期添加Puromycin（维持筛选压力，防止标记丢失）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测细胞存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：生物发光活性检测（P5代细胞RLU值波动需在±15%以内）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货3天内经qPCR证实支原体污染
- 荧光素酶活性检测低于承诺值（需提供原始检测数据）
- 细胞STR分型与数据库不匹配
- 不予重发情形：
- 未按规范添加Puromycin导致标记丢失
- 活体成像前未进行Luciferin剂量优化实验
- 使用非透明底培养板干扰发光信号采集
- 液氮保存设备故障导致细胞反复冻融
