一、细胞基本属性
细胞名称
RM - 1小鼠前列腺癌细胞
细胞别称
RM - 1细胞;小鼠前列腺癌细胞系
种属来源
小鼠(Mus musculus)
背景特征
源自C57BL/6小鼠前列腺癌细胞,经SV40大T抗原转染永生化
组织来源
前列腺癌组织
生长特性
贴壁生长(依赖胰酶消化传代)
细胞形态
不规则多边形或梭形,核质比高,呈现肿瘤细胞典型异型性
细胞代数
P5 - P15(建议使用中低代数以保证功能稳定性)
细胞规格
1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
高糖DMEM培养基(含10%胎牛血清+1%双抗)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约24 - 36小时(与血清批次及培养密度相关)
应用领域
前列腺癌机制研究、抗肿瘤药物筛选、体内外转移模型构建
供应限制
仅限于科学研究,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管需在37℃水浴中快速解冻,加入适量预热培养基轻柔混匀后离心去除冻存液,接种至含完全培养基的培养器皿。培养瓶收货后需酒精消毒表面,静置于培养箱1小时平衡后更换新鲜培养基。
传代标准
细胞融合度达80% - 90%时进行传代(通常每2 - 3天操作一次)。
传代比例
推荐1:3至1:5分种(建议初始接种密度1×10⁴ cells/cm²)。
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化1 - 2分钟,显微镜下观察细胞间隙扩大后立即加入含血清培养基终止消化。
关键注意
避免消化过度导致细胞膜损伤,传代后建议6小时内更换培养基以清除残余酶类。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO、40%基础培养基及50%胎牛血清)。
冻存密度
推荐冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL。
冻存流程
离心收集对数生长期细胞,缓慢滴加冻存液重悬,分装至冻存管后按程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
质检标准
复苏后活率≥90%(台盼蓝染色法),连续传代3次内无形态异常,STR鉴定结果与数据库完全匹配。
四、售后服务承诺
质量保障
每批次细胞提供STR鉴定报告、支原体检测阴性证明及活率检测数据。
重发条款
符合以下情形可申请重发:1. 干冰运输期间温度异常导致细胞死亡(需提供运输包装记录);2. 到货72小时内经PCR证实微生物污染;3. STR位点匹配率<85%;4. 复苏活率<90%(需提供台盼蓝染色视频)。
免责声明
以下情况不承担责任:1. 使用非指定培养基或血清;2. 解冻后超48小时未贴壁仍继续培养;3. 擅自修改冻存程序导致细胞损伤;4. 未按规范进行定期支原体检测。