一、细胞基本属性
- 细胞名称：RAW264.7+GFP小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
- 细胞别称：RAW 264.7 GFP+、小鼠巨噬细胞白血病细胞、GFP标记RAW264.7
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景品系：BALB/c小鼠（雄性来源）
- 组织来源：Abelson鼠白血病病毒诱导的腹腔肿瘤组织
- 生长特性：贴壁/半贴壁生长（可悬浮培养）
- 细胞形态：圆形或类圆形，单核形态，GFP荧光标记稳定表达
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用P5 - P10代以保证GFP表达稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基+10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%双抗
- 培养条件：气相5% CO₂；温度37℃；湿度95%
- 冻存条件：含10% DMSO的完全培养基， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约18 - 24小时（与培养密度及血清批次相关）
- 荧光特性：EGFP稳定表达（需488nm激发光检测）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶酒精擦拭后直接置于CO₂培养箱，4小时后首次换液
- 传代标准：细胞密度达80% - 90%融合（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:6（根据实验需求调整接种密度）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA溶液，37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：GFP表达需定期检测（建议每月流式检测荧光阳性率＞95%）；传代后需48小时恢复期再进行实验操作；悬浮细胞需离心收集后重新贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：完全培养基+10% DMSO（现配现用）
- 冻存密度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于预冷冻存液；程序降温4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证：台盼蓝染色存活率≥90%；荧光显微镜观察GFP表达效率；吞噬功能检测（推荐使用荧光微球验证）
四、售后服务承诺
- 重发标准：干冰运输中温度异常导致细胞团块融化；到货72小时内经流式检测GFP阳性率＜90%；支原体污染（需提供第三方检测报告）；细胞STR鉴定与数据库不匹配
- 免责条款：使用非推荐培养基导致GFP表达沉默；复苏后培养超过72小时未换液；擅自进行基因编辑等遗传操作；未按要求定期检测荧光标记稳定性
