一、细胞基本属性
细胞名称
PT - 67 MLV - 10A1逆转录病毒包装细胞系
细胞别称
PT - 10A1包装细胞；MLV假病毒生产细胞；逆转录病毒包装体系
种属来源
小鼠（Mus musculus）
细胞背景
经MLV - 10A1 env基因修饰的逆转录病毒包装系统，稳定表达gag - pol蛋白
组织来源
胚胎成纤维细胞系衍生
生长特性
贴壁生长（依赖高血清培养基）
细胞形态
成纤维样，长梭形，单层贴壁扩展
细胞代数
P5 - P15（建议使用前10代以保证病毒包装效率）
细胞规格
1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管（无血清冻存体系）
培养基
DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
培养条件
气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
程序降温冻存液（含DMSO及稳定剂），液氮长期保存
病毒产量
≥1×10⁶ CFU/mL（需配合转移载体共转染）
安全等级
BSL - 2实验室操作（需二级生物安全柜）
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管复苏：37℃水浴解冻后离心去冻存液，重悬于预温培养基
培养瓶处理：酒精擦拭后直接置于CO₂培养箱平衡
传代标准
融合度达90% - 95%（建议每2 - 3天传代维持高活性）
传代比例
1:4至1:6（接种密度建议2×10⁴ cells/cm²）
消化方法
0.25% Trypsin - EDTA消化2 - 3分钟，含血清培养基终止
质量控制
每批次检测：支原体阴性报告、gag - pol基因PCR验证、10A1 env蛋白免疫印迹
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含8% DMSO+92% FBS）
冻存密度
5×10⁶ cells/mL（保证复苏后快速恢复）
冻存程序
程序降温盒-80℃过夜后转移至液氮气相层
功能验证
复苏后传代两次检测病毒包装效率（荧光报告基因法）
四、售后服务承诺
质保范围
1. 到货活率≥90%（台盼蓝法）
2. 支原体检测阴性（培养法+PCR法双验证）
3. 包装功能验证数据支持（提供标准质粒对照）
技术支持
免费提供：
• 病毒包装标准操作流程（SOP）
• 10A1env宿主范围说明文档
• 逆转录病毒滴度测定方案
注：本产品适用于基因治疗载体开发、病毒受体研究等科研用途，严禁用于人体或临床相关实验。操作需遵守《病原微生物实验室生物安全管理条例》
