一、细胞基本属性
- 细胞名称:panc02+LUC小鼠胰腺癌细胞(荧光素酶标记)
- 细胞别称:panc02 - LUC细胞;荧光素酶标记胰腺癌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景信息:C57BL/6小鼠胰腺癌模型来源,通过慢病毒转染稳定表达荧光素酶基因
- 组织来源:胰腺癌组织(原位移植瘤单克隆化培养)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多角形或梭形,单层贴壁后呈致密排列
- 细胞代数:P3 - P8(确保荧光素酶标记稳定性及肿瘤特性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+0.5mg/mL G418筛选)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
- 荧光素酶活性验证:体外生物发光检测(Luciferin底物激发,信号强度≥1×10^5 RLU/10^4 cells)
- 应用方向:活体成像追踪肿瘤转移、药物疗效评估、体内外增殖监测
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内外诊断
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精擦拭外表面,静置培养箱4小时平衡后换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:3至1:4(接种密度建议3×10^4 cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱落
- 注意事项
- 避免频繁传代导致荧光素酶表达衰减(建议P8代内使用)
- 培养时维持G418筛选压力(防止标记基因丢失)
- 贴壁前确保培养器皿经胶原蛋白包被
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+30% FBS)
- 冻存密度:1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤
- 消化后离心去上清,重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 荧光素酶活性复测(信号强度下降≤10%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 2. 到货72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测图像)
- 3. 荧光素酶信号缺失(需提供Luciferin激发检测原始数据)
- 4. 细胞STR鉴定与备案信息不符
- 不予重发情形
- 1. 未按规范维持G418筛选导致标记丢失
- 2. 使用非胶原包被器皿影响贴壁效率
- 3. 复苏后培养超过5代导致特性改变
- 4. 未提供完整实验记录及检测证据