一、细胞基本属性
- 细胞名称：P815小鼠肥大细胞瘤细胞
- 细胞别称：P815细胞；肥大细胞瘤细胞；小鼠肥大细胞白血病细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景来源：DBA/2小鼠肥大细胞瘤组织
- 组织来源：肥大细胞瘤组织（源自皮肤或腹腔）
- 生长特性：悬浮生长（部分贴壁依赖性亚系需验证培养条件）
- 细胞形态：圆形或椭圆形，悬浮状态下呈单个或小簇聚集，贴壁亚系呈多角形
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用中低代次以维持功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含10% FBS + 1%青霉素/链霉素）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 36小时（依赖培养密度与血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，直接置于培养箱静置培养
- 传代标准：悬浮细胞密度达1×10^6 cells/mL或贴壁细胞融合度达80% - 90%
- 传代比例：
- 悬浮细胞：1:3至1:5（维持密度2×10^5 - 5×10^5 cells/mL）
- 贴壁亚系：1:2至1:3（使用0.25% Trypsin - EDTA消化）
- 注意事项：
- 悬浮细胞传代需轻柔离心（1000rpm，5分钟）避免机械损伤
- 贴壁亚系需及时终止消化（细胞收缩变圆后立即加入含血清培养基）
- 定期检测支原体污染（建议每2个月一次）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 90%基础培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：组胺释放实验或β - 己糖胺酶活性检测（P10代内需维持分泌功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供液氮罐或干冰状态证明）
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测图像）
- 细胞复苏存活率低于90%（需提供台盼蓝染色结果）
- 种属鉴定与描述不符（需提供STR或PCR检测报告）
- 不予重发情形：
- 未按推荐条件保存或延迟复苏超过48小时
- 使用非指定培养基导致细胞状态异常
- 自行改造细胞或反复冻融导致功能丧失
- 未提供完整污染检测证据的争议案例
注：以上操作均需在生物安全二级（BSL - 2）实验室进行，建议定期进行核型分析以监控遗传稳定性。
