一、细胞基本属性
细胞名称:P19小鼠畸胎瘤细胞
细胞别称:P19细胞、小鼠畸胎瘤干细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
组织来源:雄性129品系小鼠睾丸畸胎瘤组织
细胞特性:多能性胚胎癌细胞,可诱导分化为神经细胞、心肌细胞等
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质包被)
细胞形态:未分化时呈圆形或短梭形,分化后形态多样
细胞代数:P5 - P15(建议使用代数以保证分化潜能)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%非必需氨基酸+0.1mM β-巯基乙醇)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存
分化潜能:视黄酸诱导可分化为神经外胚层细胞,悬浮培养可形成拟胚体
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或活体移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭外壁后静置培养箱平衡1小时
传代标准:融合度达80% - 90%(贴壁细胞呈致密单层时操作)
传代比例:1:3至1:5(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
分化实验需提前进行无血清悬浮培养诱导
传代后12小时内避免移动培养瓶以减少机械应力损伤
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
程序降温:4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏存活率≥90%(台盼蓝染色检测)
功能验证:拟胚体形成实验(悬浮培养48小时应形成球形聚集体)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输失效导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于85%
4. 种属鉴定与描述不符(STR分析证明)
不予重发情形:
1. 未按规范进行预包被培养瓶直接接种
2. 使用非推荐诱导方案导致分化异常
3. 冻存管反复冻融超过2次
4. 未定期检测支原体导致实验数据异常
(注:以上信息基于标准操作流程,具体实验需根据研究目的优化条件)