一、细胞基本属性
- 细胞名称:OKT11小鼠杂交瘤(抗CD2)细胞
- 细胞别称:抗CD2杂交瘤细胞、OKT11杂交瘤细胞、CD2单抗分泌细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景特征:BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合的杂交瘤
- 生长特性:悬浮聚团生长(部分贴壁依赖性杂交瘤需轻微离心维持)
- 细胞形态:圆形或椭圆形,聚集成团状悬浮生长
- 细胞代数:P5 - P15(保证单克隆抗体分泌稳定性)
- 细胞规格:1×10^6 cells/冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+2mM L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO),液氮长期保存(-196℃)
- 抗体分泌:稳定分泌抗人CD2单克隆抗体(IgG1亚型)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管复苏:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 初始培养:接种密度建议1×10^5 cells/mL,每日观察聚团状态。
- 传代标准:细胞密度达1×10^6 cells/mL或培养基显著酸化(pH<6.8)
- 传代方法:
- 无需消化:直接离心收集细胞,按1:3至1:5比例稀释传代。
- 聚团处理:轻柔吹散过度聚集的细胞团(避免机械损伤)
- 注意事项:
- 维持密度:低于2×10^5 cells/mL时补充新鲜培养基。
- 抗体检测:定期通过ELISA验证上清中抗CD2抗体效价。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 冻存密度:1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集对数生长期细胞,重悬于预冷冻存液。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ -80℃ 24小时→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 存活率:复苏后24小时台盼蓝染色≥90%。
- 功能验证:流式细胞术检测上清中抗CD2抗体结合活性。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 到货3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据)。
- 复苏后抗体分泌功能缺失(需提供ELISA检测数据)。
- 细胞STR鉴定与档案不符。
- 不予重发情形:
- 未按规范进行细胞复苏(如高温解冻或未离心去除DMSO)。
- 使用含β - 巯基乙醇的培养基导致细胞毒性。
- 未定期检测支原体造成交叉污染。
- 长时间密度过高引发细胞凋亡。
(注:本产品需配合CD2抗原阳性细胞进行功能验证,建议每3个月进行单克隆化亚克隆筛选以维持抗体分泌稳定性。)