一、细胞基本属性
- 细胞名称：OP9小鼠骨髓基质细胞
- 细胞别称：OP9基质细胞；骨髓基质细胞系；骨髓基质支持细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 细胞系背景：源自新生C57BL/6小鼠颅骨骨髓，经SV40大T抗原永生化处理
- 组织来源：骨髓组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖基质蛋白包被）
- 细胞形态：成纤维样长梭形，贴壁伸展后呈辐射状排列
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：α - MEM培养基（含20%胎牛血清+1% GlutaMAX添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：~24 - 48小时（与共培养体系及血清批次相关）
- 应用范围：专用于支持造血干细胞分化及淋巴系细胞共培养研究，仅限科研用途。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基，接种于预包被培养器皿。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱4小时待细胞贴壁后更换新鲜培养基。
- 传代标准：细胞融合度达90%-95%（贴壁致密但未过度增殖时传代）。
- 传代比例：1:4至1:6（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）。
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落，镜下确认完全脱附后终止消化。
- 注意事项
- 传代前需预包被培养皿（建议使用0.1%明胶处理1小时）。
- 避免频繁传代（超过P15代可能丧失支持造血功能）。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+30% FBS+基础培养基）。
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL。
- 冻存步骤
- 消化后离心收集细胞，重悬于预冷冻存液。
- 程序降温：4℃平衡30分钟→转移至冻存盒 - 80℃过夜→长期储存于液氮。
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测贴壁率（应≥85%）。
- 功能验证：与造血干细胞共培养14天，需维持细胞层完整性及支持分化能力。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）。
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供无菌检测报告）。
- 细胞复苏后贴壁率低于80%（需提供接种后48小时显微照片）。
- 种属鉴定结果与描述不符（需提供STR检测报告）。
- 不予重发情形
- 未使用推荐包被基质或培养基导致细胞功能异常。
- 共培养实验中因操作不当引起的细胞层破坏。
- 超过P15代细胞用于关键实验导致结果偏差。
- 未按规范进行细胞支原体检测直接开展实验。
