一、细胞基本属性
细胞名称
NG108 - 15小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤融合细胞
细胞别称
NG108 - 15杂交瘤细胞;小鼠神经瘤 - 大鼠胶质瘤融合细胞
种属来源
小鼠(Mus musculus)与大鼠(Rattus norvegicus)杂交细胞系
细胞背景
由小鼠神经母细胞瘤(N18TG2)与大鼠胶质瘤细胞(C6 - BU - 1)通过聚乙二醇融合技术构建
生长特性
贴壁生长(需胶原或聚赖氨酸包被培养器皿)
细胞形态
不规则多角形或梭形,胞体透亮,易形成神经突样结构
细胞代数
P5 - P15(推荐使用代数以确保电生理特性稳定)
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
高糖DMEM(含10%胎牛血清 + 1% HAT添加剂 + 2mM谷氨酰胺)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期保存
倍增时间
约36 - 48小时(受血清批次及分化状态影响)
供应限制
仅限体外研究,不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基
培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱,4小时后首次换液
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(分化状态可能影响增殖速度)
传代比例
1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱离
注意事项
分化诱导需降低血清浓度至2%并添加cAMP类似物
避免频繁换液(建议每48小时更换50%培养基)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS +神经保护肽)
细胞密度
冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
消化后离心去上清,轻柔重悬于冻存液
程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮气相保存
复苏验证
复苏后48小时检测神经特异性烯醇化酶表达(NSE≥80%)
功能验证:膜片钳检测动作电位(P8代细胞应保持电兴奋性)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 干冰运输期间温度记录异常(需提供温度追踪文件)
2. 到货7天内经检测证实交叉污染(需STR鉴定报告)
3. 未分化细胞占比低于90%(免疫荧光法检测巢蛋白表达)
不予重发情形
1. 未使用胶原包被培养皿导致细胞贴壁失败
2. 擅自添加神经营养因子诱导异常分化
3. 超低温保存温度高于 - 130℃
4. 未按规范进行电生理检测导致数据偏差