NG108-15小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞

小鼠细胞系

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XM-X00661×10^6小鼠细胞系1800


 一、细胞基本属性

细胞名称 

NG108 - 15小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤融合细胞 

细胞别称 

NG108 - 15杂交瘤细胞;小鼠神经瘤 - 大鼠胶质瘤融合细胞 

种属来源 

小鼠(Mus musculus)与大鼠(Rattus norvegicus)杂交细胞系 

细胞背景 

由小鼠神经母细胞瘤(N18TG2)与大鼠胶质瘤细胞(C6 - BU - 1)通过聚乙二醇融合技术构建 

生长特性 

贴壁生长(需胶原或聚赖氨酸包被培养器皿) 

细胞形态 

不规则多角形或梭形,胞体透亮,易形成神经突样结构 

细胞代数 

P5 - P15(推荐使用代数以确保电生理特性稳定) 

细胞规格 

1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液) 

培养基 

高糖DMEM(含10%胎牛血清 + 1% HAT添加剂 + 2mM谷氨酰胺) 

培养条件 

气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95% 

冻存条件 

无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期保存 

倍增时间 

约36 - 48小时(受血清批次及分化状态影响) 

供应限制 

仅限体外研究,不可用于活体移植或药物生产


 二、细胞培养操作指南

收货处理 

 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预温培养基 

 培养瓶:75%酒精表面消毒后直接置于培养箱,4小时后首次换液 

传代标准 

细胞融合度达80% - 90%(分化状态可能影响增殖速度) 

传代比例 

1:3至1:5(建议接种密度1×10^4 cells/cm²) 

消化方法 

 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶) 

 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞脱离 

注意事项 

 分化诱导需降低血清浓度至2%并添加cAMP类似物 

 避免频繁换液(建议每48小时更换50%培养基)


 三、细胞冻存操作规范

冻存液配方 

无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS +神经保护肽) 

细胞密度 

冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL 

冻存步骤 

 消化后离心去上清,轻柔重悬于冻存液 

 程序降温:4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮气相保存 

复苏验证 

 复苏后48小时检测神经特异性烯醇化酶表达(NSE≥80%) 

 功能验证:膜片钳检测动作电位(P8代细胞应保持电兴奋性)


 四、售后服务承诺

重发标准 

1. 干冰运输期间温度记录异常(需提供温度追踪文件) 

2. 到货7天内经检测证实交叉污染(需STR鉴定报告) 

3. 未分化细胞占比低于90%(免疫荧光法检测巢蛋白表达) 

不予重发情形 

1. 未使用胶原包被培养皿导致细胞贴壁失败 

2. 擅自添加神经营养因子诱导异常分化 

3. 超低温保存温度高于 - 130℃ 

4. 未按规范进行电生理检测导致数据偏差