一、细胞基本属性
- 细胞名称：neuro - 2a+luc小鼠脑神经瘤细胞（荧光素酶标记）
- 细胞别称：neuro - 2a - luc；荧光素酶标记小鼠神经母细胞瘤细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景特征：源于A/J小鼠神经母细胞瘤，经慢病毒转染稳定表达荧光素酶基因
- 组织来源：脑神经瘤组织
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：不规则梭形或多边形，可见神经突样结构
- 细胞代数：P5 - P15（荧光素酶活性稳定表达代数范围）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：高糖DMEM+10% FBS+1%双抗+200μg/mL G418维持筛选
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及海藻糖），液氮长期保存
- 荧光特性：萤火虫荧光素酶稳定表达，底物腔肠素检测发光强度≥1×10^4 RLU/10^4 cells
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体成像外的其他动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
- 传代标准：细胞融合度达70%-80%（高密度易诱发自发分化）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含1mM EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至单细胞悬液
- 荧光维持：
- 传代后48小时内添加G418维持筛选压力
- 避免长期无筛选培养（可能导致荧光素酶表达丢失）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO+5%蔗糖）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心去上清，预冷冻存液重悬细胞
- 程序降温：4℃ 30min → - 80℃ 24h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测荧光素酶活性（需达冻存前80%以上）
- 形态学确认：维持典型神经瘤细胞突触结构
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 干冰运输全程温度高于-60℃（需提供温度记录仪数据）
- 到货7日内证实荧光素酶活性缺失（需提供原始检测数据）
- 细胞污染经第三方检测确认（限细菌/真菌污染）
- STR比对显示非neuro - 2a背景
- 不予重发情形：
- 未按要求进行G418筛选导致荧光丢失
- 采用非推荐包被材料（如未使用胶原基质）
- 实验性诱导分化后导致的特性改变
- 活体成像实验后回收的细胞再培养
