一、细胞基本属性
- 细胞名称:NCTC1469(NCTC CLONE 1469)小鼠正常肝细胞
- 细胞别称:小鼠肝细胞;NCTC克隆1469;正常肝细胞系
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体无肝脏疾病史)
- 组织来源:肝脏组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被表面)
- 细胞形态:典型多边形或上皮样,形成紧密单层结构
- 细胞代数:P3 - P8(确保代谢活性与功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗+1%非必需氨基酸)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与营养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟,细胞边缘卷曲后终止消化
- 注意事项:
- 避免消化过度(防止细胞膜完整性受损)
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞,重悬于冻存液后分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮保存
- 复苏验证:
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:白蛋白分泌检测(P5代细胞应维持正常分泌水平)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 到货3日内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%
- 种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 客户未在48小时内复苏细胞
- 使用非指定培养基导致功能异常
- 未按规范进行传代或冻存操作
- 实验污染后未及时反馈