一、细胞基本属性
细胞名称:MPC - 5小鼠肾足细胞
细胞别称:小鼠肾小球足细胞;条件永生化足细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年小鼠(性别不限,供体经肾病基因筛选)
组织来源:肾小球组织(经免疫磁珠分选纯化)
生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
细胞形态:不规则星状或多突触形态,融合后呈网状结构
细胞代数:P5 - P10(建议使用代数,维持足细胞分化特性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25胶原包被培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12(含10% FBS+足细胞分化诱导因子)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞膜稳定剂),液氮长期保存
倍增时间:约72 - 96小时(与分化状态相关)
供应限制:仅用于非临床研究,不可用于体内实验或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管复苏需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶收货后静置培养箱4小时再观察贴壁情况。
传代标准:细胞密度达80% - 90%融合时传代(建议每5 - 7天操作)
传代比例:1:2至1:3(低密度接种利于维持分化表型)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含钙离子螯合剂),37℃消化3 - 5分钟,显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即终止。
注意事项:
消化过程需严格控制时间,避免损伤足细胞裂隙膜结构;传代后48小时内避免频繁移动培养瓶,确保足突结构重建。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清专用冻存液(含8% DMSO及足细胞保护剂)
细胞密度:推荐冻存浓度1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
细胞悬液与冻存液按比例混合后,分装至冻存管,程序降温:4℃平衡30分钟,- 80℃过夜后转入液氮气相保存。
复苏验证:
复苏后48小时检测Nephrin蛋白表达(免疫荧光法);细胞存活率≥85%(台盼蓝排斥试验);透射电镜确认足突结构完整性。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 干冰运输链断裂导致细胞活性丧失(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经PCR证实支原体污染
3. 细胞复苏存活率低于承诺值(提供染色检测视频)
4. 特异性标记物(WT1/Synaptopodin)表达缺失
不予重发情形:
1. 使用非胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 擅自添加分化诱导因子以外的生物制剂
3. 超过推荐代数(P10)继续传代导致的特性丢失
4. 未按要求进行周期性分化状态检测
(注:本产品需配合胶原包被培养器皿使用,实验前建议进行足细胞分化状态评估)