一、细胞基本属性
- 细胞名称：MLE - 12小鼠肺上皮细胞
- 细胞别称：小鼠肺泡上皮细胞；肺上皮细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景信息：源自转基因小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞，保留表面活性蛋白合成功能
- 组织来源：肺组织肺泡上皮
- 生长特性：贴壁生长（需胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：多角形或铺路石样单层排列，接触抑制后呈扁平状
- 细胞代数：P4 - P10（推荐使用代数，确保功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含5% FBS + 胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂+ 10mM HEPES）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（依赖培养基质与细胞密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外壁，静置培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 传代前需预铺胶原基质（提升贴壁效率）
- 避免频繁观察扰动细胞层（影响单层完整性）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 40%基础培养基+ 50% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测存活率（台盼蓝染色≥85%）
- 功能验证：qPCR检测表面活性蛋白C（SP - C）表达水平
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输途中温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 7天内证实微生物污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏存活率低于80%
- 物种鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 未按推荐培养基配制引发细胞功能异常
- 冻存管反复冻融或长期暴露于-80℃
- 实验操作污染未提供证据
