一、细胞基本属性
细胞名称:MH - S小鼠肺泡巨噬细胞
细胞别称:MH - S细胞;小鼠肺泡巨噬细胞系
种属来源:小鼠(Mus musculus)
背景特征:源自BALB/c小鼠肺泡巨噬细胞,经SV40病毒永生化处理
组织来源:肺组织肺泡腔(通过支气管肺泡灌洗法分离)
生长特性:贴壁生长(部分细胞可呈半悬浮状态)
细胞形态:多形性,以圆形或梭形为主,活化后可见伪足伸展
细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,确保功能稳定性和增殖能力)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI - 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+0.05mM β - 巯基乙醇)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
增殖特性:~24 - 48小时(密度依赖性,高密度时生长减缓)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:酒精擦拭表面,静置于培养箱1小时稳定后换液
传代标准:细胞融合度达80%-90%(贴壁细胞需及时传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
避免过度吹打(巨噬细胞易受机械损伤)
传代后48小时内避免频繁观察,减少细胞应激
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
细胞密度:冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
功能验证:吞噬荧光微球实验(P8代细胞吞噬效率应≥70%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 收货7天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据)
3. 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
4. 种属鉴定与描述不符(STR或PCR验证)
不予重发情形:
1. 未按推荐培养基及条件培养导致功能异常
2. 细胞冻存后未及时转入液氮导致失活
3. 实验操作污染(如未使用无菌超净台)
4. 超过建议使用代数(P15)后出现性能下降