一、细胞基本属性
- 细胞名称：MC3T3 - E1 subclone 14小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14
- 细胞别称：MC3T3 - E1亚克隆14；小鼠颅顶前骨细胞亚型
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄来源：新生小鼠（C57BL/6品系，无骨骼发育异常）
- 组织来源：颅顶前骨组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质贴附）
- 细胞形态：长梭形或多角形，成纤维样排列，高融合度时呈铺路石状单层
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证成骨分化潜能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：α - MEM基础培养基（含10% FBS+1%双抗+50μg/mL抗坏血酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（与血清批次及培养密度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液，重悬于预热培养基后接种
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置于培养箱内2小时平衡后换液
- 传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 消化后轻柔吹打避免机械损伤
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：成骨诱导后碱性磷酸酶活性检测（P8代细胞应保持分化能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实支原体或细菌污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏存活率低于90%（需提供台盼蓝染色照片）
- 细胞STR鉴定与存档数据不符
- 不予重发情形：
- 客户收货后超过48小时未复苏
- 使用非推荐培养基或添加剂导致功能异常
- 未按规范进行成骨诱导致实验失败
- 未定期检测支原体引发交叉污染
