一、细胞基本属性
细胞名称
MA-891小鼠乳腺癌高转移细胞
细胞别称
MA-891细胞;小鼠乳腺癌高转移亚型
种属来源
小鼠(Mus musculus)
年龄性别
BALB/c雌性小鼠(6 - 8周龄,无特定病原体环境培育)
组织来源
乳腺肿瘤组织(经体内连续传代筛选高转移特性)
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态
不规则多边形,部分呈纺锤形,高密度时重叠生长倾向
细胞代数
P5 - P15(建议使用中低代次以维持转移表型稳定性)
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基
小鼠乳腺癌专用培养基(含10% FBS+表皮生长因子+胰岛素)
培养条件
气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含8% DMSO及细胞特异性保护剂),液氮长期保存
倍增时间
~24 - 48小时(受细胞密度及生长因子浓度影响)
供应限制
仅限肿瘤转移机制研究,禁止用于活体致瘤实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴解冻后,1200rpm离心3分钟去除冻存液,重悬于预热培养基
培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱,4小时后首次换液
传代标准
融合度达90% - 95%(高密度易触发自发分化)
传代比例
1:3至1:5(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法
使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
基质包被培养皿可增强贴壁效率
传代后12小时需补充5ng/mL肝素生长因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
专用无血清冻存液(含8% DMSO+胎牛血清替代物)
细胞密度
冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤
消化后离心收集细胞,缓慢逐滴加入冻存液
程序降温:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮贮存
复苏验证
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
功能验证:Transwell侵袭实验(P10代细胞应维持穿透Matrigel能力)
四、售后服务承诺
重发标准
1.物流温控记录异常(> - 130℃持续超30分钟)
2.到货48小时内经qPCR证实支原体污染
3.细胞贴壁率低于70%(接种24小时评估)
4.STR图谱与数据库记录不符
不予重发情形
1.未使用指定胶原包被培养器皿
2.擅自添加浓度>15%的血清进行培养
3.解冻后未立即去除冻存液直接培养
4.超过三代未进行转移表型验证实验
(注:所有操作需在生物安全二级实验室进行,建议定期进行转移特性验证,包括肺转移结节形成实验及MMP - 2/9分泌检测)