MA-891小鼠乳腺癌高转移细胞

小鼠细胞系

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XM-X00481×10^6小鼠细胞系1350


一、细胞基本属性

细胞名称

MA-891小鼠乳腺癌高转移细胞

细胞别称

MA-891细胞;小鼠乳腺癌高转移亚型

种属来源

小鼠(Mus musculus)

年龄性别

BALB/c雌性小鼠(6 - 8周龄,无特定病原体环境培育)

组织来源

乳腺肿瘤组织(经体内连续传代筛选高转移特性)

生长特性

贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)

细胞形态

不规则多边形,部分呈纺锤形,高密度时重叠生长倾向

细胞代数

P5 - P15(建议使用中低代次以维持转移表型稳定性)

细胞规格

1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)

培养基

小鼠乳腺癌专用培养基(含10% FBS+表皮生长因子+胰岛素)

培养条件

气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%

冻存条件

无血清冻存液(含8% DMSO及细胞特异性保护剂),液氮长期保存

倍增时间

~24 - 48小时(受细胞密度及生长因子浓度影响)

供应限制

仅限肿瘤转移机制研究,禁止用于活体致瘤实验


二、细胞培养操作指南

收货处理

冻存管:37℃水浴解冻后,1200rpm离心3分钟去除冻存液,重悬于预热培养基

培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱,4小时后首次换液

传代标准

融合度达90% - 95%(高密度易触发自发分化)

传代比例

1:3至1:5(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)

消化方法

使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液

37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落

注意事项

基质包被培养皿可增强贴壁效率

传代后12小时需补充5ng/mL肝素生长因子


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方

专用无血清冻存液(含8% DMSO+胎牛血清替代物)

细胞密度

冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL

冻存步骤

消化后离心收集细胞,缓慢逐滴加入冻存液

程序降温:4℃平衡30分钟→异丙醇冻存盒 - 80℃过夜→液氮贮存

复苏验证

复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)

功能验证:Transwell侵袭实验(P10代细胞应维持穿透Matrigel能力)


四、售后服务承诺

重发标准

1.物流温控记录异常(> - 130℃持续超30分钟)

2.到货48小时内经qPCR证实支原体污染

3.细胞贴壁率低于70%(接种24小时评估)

4.STR图谱与数据库记录不符

不予重发情形

1.未使用指定胶原包被培养器皿

2.擅自添加浓度>15%的血清进行培养

3.解冻后未立即去除冻存液直接培养

4.超过三代未进行转移表型验证实验


(注:所有操作需在生物安全二级实验室进行,建议定期进行转移特性验证,包括肺转移结节形成实验及MMP - 2/9分泌检测)