一、细胞基本属性
- 细胞名称：L Wnt - 3A小鼠皮下结缔组织细胞
- 细胞别称：L Wnt - 3A细胞；Wnt - 3A过表达成纤维细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 组织来源：皮下结缔组织（经基因工程改造过表达Wnt - 3A蛋白）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：成纤维细胞样，贴壁伸展后呈梭形或多角形
- 细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以确保Wnt - 3A分泌稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10%FBS + 2mM L - 谷氨酰胺+1%非必需氨基酸+400μg/mL G418筛选维持）
- 培养条件：气相：5%CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10%DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 增殖特性：稳定分泌Wnt - 3A蛋白，支持共培养体系干细胞自我更新
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于活体实验或商业化生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶：酒精擦拭表面后静置培养箱4小时，待细胞贴壁后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:4至1:6（推荐接种密度3×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%Trypsin - EDTA（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项：
- 传代后需补充G418维持筛选压力
- 避免频繁换液以保持Wnt - 3A分泌浓度
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10%DMSO+20%FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞存活率（≥85%）
- 功能验证：Western Blot检测Wnt - 3A蛋白分泌量
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货3天内经qPCR证实支原体污染
- 细胞复苏后活力低于85%（台盼蓝染色法）
- Wnt - 3A分泌功能缺失（需提供检测数据）
- 不予重发情形：
- 未使用G418筛选导致基因表达不稳定
- 培养器皿未胶原包被影响细胞贴壁
- 自行更改培养基配方导致功能异常
- 未按规范进行传代导致细胞过度老化
注：本产品需配合Wnt信号通路研究专用培养基，具体实验方案可联系技术支持获取。
