一、细胞基本属性
- 细胞名称：L929小鼠成纤维细胞
- 细胞别称：L929细胞；小鼠成纤维细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 组织来源：C3H/An小鼠皮下结缔组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质）
- 细胞形态：长梭形或星形，贴壁后呈放射状排列
- 细胞代数：P5 - P10（推荐使用代数，保证遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM（含10% FBS + 1%青霉素 - 链霉素）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖血清浓度及培养密度）
- 供应限制：仅限科研使用，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：酒精消毒表面后直接置于培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含钙镁离子）
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（成纤维细胞易卷曲脱落）
- 传代后需轻柔离心去除残留消化酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 2×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%
- 功能验证：MTT法检测细胞增殖曲线（P5代细胞应保持典型生长特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供冷链记录）
- 72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测结果）
- 细胞存活率低于85%（台盼蓝染色法）
- STR鉴定与小鼠遗传背景不符
- 不予重发情形：
- 客户未按推荐培养基培养导致形态异常
- 解冻后超过48小时未进行贴壁观察
- 未规范使用抗生素引发交叉污染
- 反复冻融导致细胞活性丧失
