一、细胞基本属性
- 细胞名称：L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)小鼠淋巴瘤细胞
- 细胞别称：L5178Y细胞；TK缺陷型淋巴瘤细胞；3.7.2C克隆株
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：雌性BALB/c小鼠（经实验室定向培育）
- 组织来源：淋巴瘤组织（源自胸腺淋巴瘤模型）
- 生长特性：悬浮生长（无需基质贴附）
- 细胞形态：圆形或类圆形，单细胞悬浮（呈现淋巴母细胞样形态）
- 细胞代数：P5 - P15（确保基因组稳定性及表型一致性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含10% FBS + 1%双抗+0.1mM β - 巯基乙醇）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖细胞密度及培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或生物安全三级以上实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 悬浮培养瓶：直接置于培养箱静置30分钟，轻柔混匀后开始培养
- 传代标准：细胞密度达1×10^6 - 2×10^6 cells/mL（通常每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度2×10^5 cells/mL）
- 操作方法
- 直接离心收集细胞（1000rpm，5分钟），弃上清后重悬于新鲜培养基
- 无需消化酶处理，避免机械损伤
- 注意事项
- 维持细胞密度低于3×10^6 cells/mL以防过度堆积
- 传代后轻柔吹打避免细胞团块形成
- 定期检测支原体污染（建议每月一次）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃过夜→转入液氮
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）
- 功能验证：TK基因表达检测（P10代内需保持杂合缺失特性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货3日内证实细菌/支原体污染（需提供检测报告）
- 复苏存活率低于90%（台盼蓝染色法）
- 细胞STR鉴定与备案信息不符
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过72小时
- 使用非推荐培养基或添加未经验证的生长因子
- 多次冻融导致细胞损伤
- 未按规范进行污染检测直接用于实验
（注：所有操作需符合生物安全二级实验室标准，细胞特性及应用建议以文献及ATCC参考数据为准。）
