一、细胞基本属性
- 细胞名称:LLC+LUC小鼠肺癌细胞(荧光素酶标记)
- 细胞别称:LUC - LC细胞;荧光素酶标记Lewis肺癌细胞;Luc+ LLC细胞
- 种属来源:小鼠(Mus musculus)
- 背景品系:C57BL/6小鼠(经基因工程改造稳定表达荧光素酶)
- 组织来源:Lewis肺癌组织原位移植瘤模型
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形或梭形,高核质比,成簇生长
- 细胞代数:P5 - P15(传代稳定性经过荧光素酶活性验证)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:RPMI 1640培养基(含10% FBS+1%双抗+300μg/mL嘌呤霉素维持筛选)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS),液氮长期保存
- 荧光素酶活性:≥5×10⁴ RLU/10⁴ cells(通过活体成像系统定量检测)
- 应用限制:仅限体外实验及小动物活体成像研究,不可用于人体或临床
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用试剂:0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 操作流程:37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 荧光维持
- 嘌呤霉素添加:每代传代后需添加嘌呤霉素(终浓度300μg/mL)
- 活性检测:定期进行荧光素酶活性检测(建议每5代检测一次)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:基础冻存液:70% RPMI 1640+20% FBS+10% DMSO
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤
- 重悬操作:消化后细胞离心去上清,缓慢滴加冻存液重悬
- 降温流程:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证
- 存活率检测:复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 活性验证:复苏后48小时检测发光值
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 到货72小时内证实支原体污染(需提供检测报告)
- 荧光素酶活性低于标准值50%(需提供原始检测数据)
- 细胞STR分型与数据库不匹配
- 免责条款
- 未按规定使用嘌呤霉素导致荧光标记丢失
- 活体成像时未注射底物D - 荧光素导致信号缺失
- 使用非推荐传代方法引起细胞特性改变
- 超过建议代数(P15)后功能异常
备注:本产品需配合活体成像系统及D - 荧光素钾盐使用,实验前请参阅《小动物肿瘤模型操作指南》