一、细胞基本属性
- 细胞名称：LLC小鼠肺癌细胞（Lewis Lung Carcinoma Cells）
- 细胞别称：LLC；Lewis肺癌细胞；小鼠肺癌细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 背景品系：C57BL/6小鼠（雄性来源）
- 组织来源：肺组织原位癌病灶
- 生长特性：贴壁生长（依赖基质蛋白包被）
- 细胞形态：不规则多边形或纺锤形，汇合后呈片状聚集
- 细胞代数：P5 - P10（确保增殖活性和成瘤特性稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖接种密度与传代频率）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内外治疗研究
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含酚红指示剂）
- 37℃消化30 - 60秒，轻拍瓶壁至细胞脱落即刻终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（影响细胞膜完整性）
- 传代后12小时更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及稳定剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温：4℃ 20min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）
- 功能验证：Transwell迁移实验（P5代细胞应维持侵袭活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1.运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 2.3天内证实真菌/细菌污染（需提供镜检图像及PCR报告）
- 3.细胞复苏存活率低于85%（需提供台盼蓝染色记录）
- 4.STR鉴定与数据库不符
- 不予重发情形：
- 1.客户延迟复苏超过48小时
- 2.使用非DMEM培养基导致增殖异常
- 3.未按梯度降温冻存造成细胞损伤
- 4.未进行定期支原体检测引发实验污染
（注：以上内容严格遵循科研伦理，实验操作需符合所在机构生物安全规范）
