一、细胞基本属性
- 细胞名称：K7M2WT（K7M2 - wt）小鼠骨肉瘤成骨细胞
- 细胞别称：K7M2野生型细胞；小鼠骨肉瘤成骨细胞；骨肉瘤成骨细胞系
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：6 - 8周龄雌性BALB/c小鼠（供体经病理学确认骨肉瘤模型）
- 组织来源：骨肉瘤组织原代分离
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质）
- 细胞形态：梭形或多角形，贴壁后呈单层铺展，接触抑制后排列有序
- 细胞代数：P4 - P10（确保增殖活性与表型稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含含血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+1%青霉素/链霉素+成骨诱导添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖细胞密度与培养条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱1小时平衡后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用：0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺）
- 操作：37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免消化过度（防止细胞膜损伤）
- 传代后12小时更换新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含血清冻存液（含10% DMSO及10% FBS）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%）
- 功能验证：碱性磷酸酶活性检测（P5代细胞应维持成骨分化潜能）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 3天内证实微生物污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏存活率低于90%（台盼蓝染色结果）
- 物种鉴定或特定标志物检测与描述不符
- 不予重发情形
- 客户解冻后超48小时未进行培养操作
- 使用非推荐培养基或添加剂导致功能异常
- 未按规范进行冻存或反复冻融
- 未执行建议的污染防控措施
