一、细胞基本属性
细胞名称：J774A.1小鼠单核巨噬细胞
细胞别称：J774A.1细胞；小鼠巨噬细胞；单核巨噬细胞系
种属来源：小鼠（Mus musculus）
细胞类型：单核巨噬细胞白血病来源
组织来源：BALB/c小鼠单核细胞白血病组织
生长特性：贴壁生长（部分亚系可能呈现半贴壁特性）
细胞形态：不规则梭形或多角形，活化状态下可见伪足延伸
细胞代数：P5 - P15（推荐使用代数以保证功能稳定性）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO）， -150℃以下长期保存
倍增时间：~18 - 24小时（依赖传代密度与血清浓度）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
培养瓶：75%酒精擦拭表面，置于CO₂培养箱平衡2小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁细胞密度过高易自发活化）
传代比例：1:3至1:6（推荐接种密度2×10^4 cells/cm²）
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA或细胞刮轻柔处理
37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察细胞间隙扩大后终止
注意事项
避免频繁传代（可能诱导表型漂移）
传代后48小时内避免刺激实验（确保细胞状态稳定）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清）
细胞密度
冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
程序降温：4℃ 30min → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
功能验证：LPS刺激后TNF - α分泌检测（P10代内需维持炎症响应能力）
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
2. 72小时内证实支原体污染（需提供荧光PCR报告）
3. 细胞活力低于85%（台盼蓝染色法）
4. 种属鉴定结果不符
不予重发情形
1. 解冻后未在1小时内接种
2. 使用含β - 巯基乙醇的培养基导致细胞毒性
3. 未定期进行支原体检测引发的交叉污染
4. 自行诱导分化后功能异常
