一、细胞基本属性
细胞名称:ID8+LUC小鼠卵巢上皮癌细胞(荧光素酶标记)
细胞别称:ID8 - LUC细胞;小鼠卵巢上皮癌荧光素酶报告细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
背景品系:C57BL/6
组织来源:卵巢上皮组织(经化学诱导癌变)
荧光标记:稳定表达萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)
生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
细胞形态:不规则多边形,核质比高,成簇生长倾向
细胞代数:P5 - P15(建议控制代次以维持荧光素酶活性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基+10%FBS+1%NEAA+2mM L - 谷氨酰胺+1%丙酮酸钠
筛选维持:含400μg/mL G418维持荧光素酶表达
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10%DMSO+胎牛血清替代物),-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(依赖细胞密度与传代处理)
应用范围:肿瘤转移活体成像、药物疗效动态监测、卵巢癌机制研究
生物安全:BSL - 2级操作(需在二级生物安全柜中处理)
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱,4小时后首次换液
传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶辅助细胞脱落
注意事项:
传代前需用PBS清洗去除死细胞碎片
避免过度吹打导致荧光素酶基因丢失
定期进行生物发光检测验证信号稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10%DMSO+30%FBS替代物)
细胞密度:冻存浓度5×10^6 cells/mL
冻存步骤:
消化后离心收集细胞,预冷冻存液重悬
程序降温:4℃30分钟→ - 80℃24小时→液氮长期储存
质检标准:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
荧光素酶活性验证:接种24小时后注射底物D - 荧光素(150mg/kg),小动物活体成像检测光子通量≥1×10^4 photons/s/cm²
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货72小时内经qPCR证实支原体污染
3. 荧光素酶基础活性低于产品说明书标注值
4. 细胞STR鉴定与数据库不匹配
免责声明:
1. 未使用指定胶原包被培养器皿导致贴壁失败
2. 未定期添加G418导致荧光素酶表达沉默
3. 活体成像前未进行细胞浓度标准化处理
4. 超过推荐代次(P15)后出现遗传漂移
(注:本产品需配合专用荧光素酶检测试剂盒使用,实验前请详阅技术手册)