一、细胞基本属性
细胞名称:HT-22小鼠海马神经元细胞
细胞别称:海马神经元细胞系HT-22;小鼠海马神经元永生化细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:新生C57BL/6小鼠(性别随机筛选)
组织来源:海马组织神经元
生长特性:贴壁生长(需经多聚赖氨酸包被培养器皿)
细胞形态:典型神经元多极形态,可见轴突与树突延伸
细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代内细胞保证功能特征)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1.5mL冻存管(含神经元专用冻存液)
培养基:高糖DMEM(含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1mM丙酮酸钠)
培养条件:气相:5% CO₂平衡环境;温度:37℃恒温;湿度:95%恒湿
冻存条件:神经元专用无血清冻存液(含5% DMSO及神经营养因子),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(受血清浓度及包被基质影响)
供应限制:仅限基础研究使用,禁止临床治疗或转基因实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管建议37℃水浴快速解冻后接种于预包被培养皿;培养瓶收货后需静置培养箱4小时再换液。
传代标准:细胞密度达80 - 90%融合度时传代(通常每周操作2次)。
传代比例:推荐1:2至1:3分种(最低接种密度1×10^4 cells/cm²)。
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,加入含血清培养基终止消化。
注意事项:需全程使用多聚赖氨酸包被培养器皿;消化过程需轻柔吹打避免机械损伤;换液时保留半数原培养基维持神经元活性。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:神经元专用冻存液(含5% DMSO+20% FBS+神经营养因子)。
细胞密度:推荐冻存浓度1×10^6 cells/mL。
冻存步骤:离心收集后重悬于冻存液,采用程序降温仪以1℃/min速率降温至 - 80℃后转存液氮。
复苏验证:复苏后48小时进行NeuN免疫荧光鉴定神经元纯度;MTT法检测代谢活性应达冻存前85%以上;电生理检测需保持动作电位发生能力。
四、售后服务承诺
重发标准:1.干冰运输全程温度记录异常导致细胞失活;2.到货72小时内经PCR证实支原体污染;3.复苏存活率低于80%(台盼蓝染色法);4.物种鉴定STR结果不符。
免责条款:1.客户未使用指定包被基质导致贴壁失败;2.自行添加生长因子改变培养条件;3.超过建议代数继续传代使用;4.未按规范进行定期支原体检测。
注:本产品经形态学、免疫荧光及电生理特性三重验证,适用于神经突触形成、氧化应激研究及神经退行性疾病模型构建。建议收到细胞后立即进行保种冻存,所有实验数据需注明细胞传代次数及培养条件。