一、细胞基本属性
细胞名称:HL - 1小鼠心肌细胞
细胞别称:HL - 1细胞;小鼠心肌细胞;永生化心肌细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
组织来源:心脏组织(经SV40大T抗原永生化处理)
生长特性:贴壁生长(需包被纤维连接蛋白/明胶基质)
细胞形态:单层贴壁呈梭形或多角形,具自主节律性收缩能力
细胞代数:推荐使用P5 - P10代(维持稳定电生理特性)
细胞规格:1×10^6 cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:Claycomb培养基(含10% FBS+2mM谷氨酰胺+0.1mM去甲肾上腺素)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:饱和湿度
冻存条件:含血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
增殖能力:倍增时间约24 - 48小时(受血清浓度及细胞密度影响)
应用限制:仅限体外研究,不可用于活体移植或疾病模型构建
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱,静置4小时再观察
传代标准:细胞密度达80 - 90%融合(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
采用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
基质包被需提前24小时完成(0.1%明胶溶液覆盖培养表面)
维持培养基pH7.4±0.2,避免频繁晃动影响细胞极性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:基础培养基+20% FBS+10% DMSO
冻存密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存流程:
消化后离心去上清,轻柔重悬于预冷冻存液
程序降温:4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存
复苏验证:
存活率检测:复苏后贴壁12小时台盼蓝染色≥85%
功能验证:钙离子流检测及收缩频率监测(P5代细胞应保持≥1Hz自发节律)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度追踪报告)
2. 到货48小时内证实微生物污染(需提供无菌检测证据)
3. 复苏后存活率低于80%(需提供台盼蓝染色图像)
4. 细胞特异性标志物鉴定不符(需提供α - actinin/cTnT免疫荧光结果)
免责情形:
1. 未使用指定包被基质导致贴壁失败
2. 擅自修改培养基配方影响细胞收缩功能
3. 超低温保存温度高于 - 130℃累计超过72小时
4. 未按要求进行周期性支原体检测